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R语言也可以进行ATAC数据的完整分析啦!

个人认为,R语言有两个强项,统计和绘图。在生物信息数据分析中,R语言更多时候是发挥一个科学计算和可视化的作用。当然,R语言的功能远不止于此,不仅可以作为脚本语言,解决统计分析和可视化的”小”问题,也可以编写一套完整pipeline, 解决整套数据分析的”大”问题。

本文的主角就是这样一个R包-esATAC, 这个R包提供了一整套完整的ATAC数据分析的功能,对应的文章发表在Bioinformatics上,链接如下

​​https://academic.oup.com/bioinformatics/article/34/15/2664/4924216​​

数据处理的流程图示意如下

R语言也可以进行ATAC数据的完整分析啦!_数据分析

总体分为两个部分:

  1. Raw Data Processing, 从原始的FASTQ数据开始,首先用AdapterRemoval软件去除adapter,然后通过Bowtie2将reads比对到参考基因组上,产生的bam文件去除PCR重复,将reads比对位置shift之后,得到用于下游分析的bam文件,并产生对应的bigwig文件,可以导入基因组浏览器中进行可视化
  2. Statistical Analysis,  采用F-seq软件进行peak calling, 用R包ChipSeeker进行peak注释,对于case/control实验设计,也支持差异peak分析。同时提供了下游的TF footprint, GO富集分析等分析。


作为一个pipeline, 支持一键化分析, 对于单个样本的数据,用法如下

R语言也可以进行ATAC数据的完整分析啦!_r语言_02

采用atacPipe这个函数进行分析,对于case/control的数据。用法如下

R语言也可以进行ATAC数据的完整分析啦!_数据_03

除了一键化运行外,也支持分步运行,将每个独立的功能拆分成不同的函数,部分列表如下

  1. atacUnzipAndMerge
  2. atacQCReport
  3. atacRenamer
  4. atacRemoveAdapter
  5. atacBowtie2Mapping
  6. atacLibComplexQC
  7. atacSamToBed
  8. atacBedToBigWig
  9. atacFragLenDistr
  10. atacBedUtils
  11. atacPeakCalling


通过单独运行这些函数来实现不同的功能。该R包功能完善的同时,随之而来的是体量大,安装复杂,因为依赖很多的第三方R包和软件。只要解决了安装问题,使用起来是非常方便的。对于R语言熟练的朋友,可以一试!

·end·


R语言也可以进行ATAC数据的完整分析啦!_数据_04

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